当含有下列性质蛋白质混合物A:相对分子质量12 000 pI一10 B:相对分子质量62 000 pI=4;C:相对分子

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当含有下列性质蛋白质混合物A:相对分子质量12 000,pI一10,B:相对分子质量62 000,pI=4;C:相对分子质量2 800,pI=7;D:相对分子质量9 000,pI=5。若不考虑其他因素,问:(1)当它们流经DEAE纤维素阴离子交换树脂时,这些蛋白质被洗脱顺序如何?为什么?(2)当它们流经Sephadex G-50凝胶层析柱时,这些蛋白质被洗脱顺序如何?为什么?

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热搜:下列分子中含有极性键的非极性分子是

答案解析

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  • 正确答案:(1)A、B、C、D四种蛋白质与离子交换剂结合力越弱在洗脱时越先洗脱下来由其等电点可知与DEAE纤维素阴离子交换树脂结合力由强到弱的顺序为B、D、C、A因此其洗脱顺序为:A、C、D、B。(2)当A、B、C、D四种蛋白质流经Sephadex G-50凝胶层析柱时这些蛋白质被洗脱其洗脱顺序为:B、C、A、D。其原因是凝胶过滤是根据分子大小不同的分离方法当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶层析柱时比凝胶网孔大的分子不能进入珠内网状结构而被排阻在凝胶珠之外随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动并最先流出柱外;比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外相对分子质量越大流经途径越短越最先分离出来。
    (1)A、B、C、D四种蛋白质,与离子交换剂结合力越弱,在洗脱时越先洗脱下来,由其等电点可知,与DEAE纤维素阴离子交换树脂结合力由强到弱的顺序为B、D、C、A,因此其洗脱顺序为:A、C、D、B。(2)当A、B、C、D四种蛋白质流经SephadexG-50凝胶层析柱时,这些蛋白质被洗脱,其洗脱顺序为:B、C、A、D。其原因是,凝胶过滤是根据分子大小不同的分离方法,当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶层析柱时,比凝胶网孔大的分子不能进入珠内网状结构,而被排阻在凝胶珠之外,随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙向下移动并最先流出柱外;比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外,相对分子质量越大流经途径越短,越最先分离出来。