α互补筛选法属于的筛选方式是() A.抗药性标志筛选 B.酶联免疫筛选 C.标志补救筛选 D.原位杂交筛选 E.免
标志,抗药性,原位
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Cα互补筛选是在质粒载体上插入lac Z基因的前一部分片段,这部分片段内含有多克隆位点,如果多克隆位点上没有插入外源DNA片段,在质粒被导入携带lac Z基因C端编码区的宿主细胞后,质粒携带的lac Z基因片段将正常表达,与大肠杆菌的lac Z基因产物(C端部分)互补,产生有活性的β-半乳糖苷酶,加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后,使X-gal转化成蓝色的代谢产物,可出现蓝色的菌落。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段,将使1ac Z基因灭活,不能生成有活性的β-半乳糖苷酶,结果菌落呈现白色,这种筛选方法称为“蓝白斑筛选”。因载体和宿主细胞分别表达lac Z基因的不同片段,具有互补作用,因此这种筛选方法属于标志补救筛选。
