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现有一食品,采用3,5-二硝基水杨酸法测定总糖含量、微量凯氏定氮法测定总蛋白含量,简单说明两种实验方法原理。

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答案解析

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  • 参考答案:3,5-二硝基水杨酸法:利用多糖能被酸水解,为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物3,5-二硝基水杨酸,则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在过量的NaOH碱性溶液中,此化合物呈橘红色,在540nm处有最大吸收,在一定浓度范围内还原糖的量于光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的总糖的含量。
    微量凯氏定氮法:样品与浓硫酸共热,含氮有机物分解产生氨,氨与硫酸化作用,变成硫酸铵,强碱碱化消化液,使硫酸铵分解,放出氨。借蒸汽将氨蒸至酸溶液中,根据此酸液被中和的程度,计算样品含氮量,折算出蛋白质量。