现有微量活性蛋白的水溶液 为了测定其含量和分子量 宜选用的实验方法是什么 实验原理是什么。
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现有微量活性蛋白的水溶液,为了测定其含量和分子量,宜选用的实验方法是什么,实验原理是什么。
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参考答案:宜选用的实验方法是:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法。
原理:聚丙烯酰胺凝胶电泳之所以能将不同的大分子化合物分开,是由于这些大分子化合物所带电荷的差异和分子大小不同之故,如果将电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,这些化合物在凝胶上的迁移率则完全取决于相对分子质量。SDS是十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate)的简称,它是一种阴离子去污剂,它能按一定比例与蛋白质分子结合成带负电荷的复合物,其负电荷远远超过了蛋白质原有的电荷,也就消除或降低了不同蛋白质之间原有的电荷差别,这样就使电泳迁移率只取决于分子大小这一一因素,就可根据标准蛋白质的相对分子量的对数对迁移率所作的标准曲线求得未知蛋白质的相对分子质量。
