1. PCR引物设计的原则有那些?

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  • (1)引物长度:10~30Nt;(2)碱基分布:A、T、G、C随机分布;(3)G+C含量:40%~60%,Tm=4(G+C)+2(A+T);(4)引物之间:避免3'端互补;(5)引物自身:不应形成二级结构;(6)引物3'末端碱基:最好选T、C、G,不选A;(7)引物5'末端碱基:可不与模板DNA互补。